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如何检测饲料中维生素B2,测定饲料中维生素B2含量的方法

发布时间:2013-10-25 11:25:10 新闻来源: 浏览次数:2330
简介:如何检测饲料中维生素B2,测定饲料中维生素B2含量方法的详细步骤分为4步,1.检测维生素B2的仪器与试剂;2.试样溶液的制备;3.色谱条件;4.维生素B2标准高效液相色谱图.

  维生素B2又叫做核黄素,为异咯嗪衍生物,桔黄色,易被碱、光及金属元素破坏。

  核黄素是许多氧化还原酶的重要组成部分,参与能量和蛋白质代谢。动物缺乏核黄引起体代谢紊乱。其症状:轻则表现为生长受阻,生产力下降,严重者,猪发生皮炎,形成痂皮及脓肿,眼结膜、角膜炎;母畜缺乏则出现早产,胚胎死亡及胎儿畸形;雏鸡的典型症状为足跟关节肿胀,趾内向弯曲成拳状,急性缺乏症能使腿部完全麻痹、瘫痪;种鸡缺乏时,种蛋孵化率低,雏鸡成活率低。

  液相色谱网参考国标(GB/T 14701-2002),利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪,经实践检测可提供检测饲料中维生素B2含量的HPLC方案,得出的结果准确可靠,检出限好,适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素B2的测定,仅供广大用户参考。

  以下是高效液相色谱法对饲料中维生素B2的详细检测方法。

1  仪器与试剂

1.1 仪器、设备
  LC-10Tvp高效液相色谱仪
  Vertex 色谱柱:150mm×4.6mm×5μm;
  分析天平;
  恒温水浴锅;
  针头过滤器。

1.2 试剂
  乙二胺四乙酸二钠(EDTA)
  庚烷磺酸钠
  冰乙酸
  三乙胺
  甲醇
  维生素B2标准工作液

2  试样溶液的制备
  称取维生素预混合饲料0.25g-0.5g,于100ml棕色容量瓶中,加入三分之二的提取液于80-100℃水浴中煮沸30min,待冷却后加入14ml甲醇,用提取液定容至刻度,混匀,过滤。维生素预混合饲料样液需有提取液进一步5倍-10倍,取部分过滤液过0.45µm滤膜过滤,高效液相色谱仪分析。

3  色谱条件
  色谱柱:Vertex 色谱柱 150mm×4.6mm×5μm;
  流速:1.0mL/min;
  温度:室温;
  进样量:20μL;
  检测波长:单检维生素B2为267nm,多种维生素联检为280nm。
  流动相:在已装入700ml去离子水的1000ml容量瓶中,加入50mgEDTA、1.1g庚烷磺酸钠,待全溶解后,加入25ml冰乙酸、5ml三乙胺,用去离子水定容至刻度摇匀。用冰乙酸、三乙胺调解pH至3.4±0.02,过0.45µm滤膜,取该溶液860ml与140ml甲醇混合,超声脱气,待用。

4  维生素B2标准高效液相色谱图



关键词:维生素B2的检测方法,测定饲料中维生素B2含量

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